品名： BsaⅠ限制性內(nèi)切酶

貨號： UA070035

產(chǎn)品描述
本產(chǎn)品是通過大腸桿菌（E. coli）系統(tǒng)重組表達(dá)的高純度BsaⅠ限制性內(nèi)切酶。BsaⅠ是一種IIs型限制性內(nèi)切酶，能夠識別非回文序列并在識別位點外側(cè)進行切割，產(chǎn)生特定的粘性末端。這一特性使其成為金門克?。℅olden Gate Assembly） 和線性化DNA片段制備的關(guān)鍵工具酶，廣泛應(yīng)用于分子克隆、合成生物學(xué)及質(zhì)粒構(gòu)建等領(lǐng)域。

產(chǎn)品特性

• 酶種類： IIs型限制性內(nèi)切酶

• 來源： 嗜熱脂肪芽孢桿菌（重組表達(dá)）

• 表達(dá)系統(tǒng)： 大腸桿菌（E. coli）表達(dá)系統(tǒng)

• 標(biāo)簽： His標(biāo)簽

• 分子量： 64.9 kDa（還原條件）

• 純度： >95%（SDS-PAGE驗證）

• 酶活性： 20 U/μL

• 性狀： 液體

• 儲存緩沖液： 10 mM Tris-HCl, 300 mM NaCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 500 µg/mL BSA, 50% 甘油（pH 7.4 @ 25°C）

• 反應(yīng)緩沖液： 隨酶提供10×反應(yīng)緩沖液

識別位點與切割特性

• 識別序列： 5'-GGTCTC(N)1↓-3' / 3'-CCAGAG(N)5↑-5'

• 切割方式： 在識別序列外側(cè)進行切割，產(chǎn)生4個堿基的粘性末端。

• 酶活定義： 在50 µL反應(yīng)體系中，37℃條件下，1小時內(nèi)wan全消化1 µg pXba DNA所需的酶量定義為1個活性單位（U）。

產(chǎn)品優(yōu)勢

• 金門克隆的核心工具： 其獨特的切割特性使其成為實現(xiàn)高效、無縫的多片段DNA組裝——金門克隆的首xuan酶。

• 高純度與高活性： 酶活高達(dá)20 U/μL，純度>95%，確保切割效率與特異性。

• 配套完整： 提供優(yōu)化的10×反應(yīng)緩沖液和詳細(xì)的操作步驟，開蓋即用，方便快捷。

• 活性驗證： 產(chǎn)品頁面提供使用pUC57質(zhì)粒的酶切驗證電泳圖，證明其可wan全消化1 µg質(zhì)粒DNA。

• 應(yīng)用廣泛： 除了金門克隆，也常用于質(zhì)粒線性化、制備特定粘性末端的DNA片段。

應(yīng)用

• 金門克隆（Golden Gate Assembly）與多片段DNA組裝

• 質(zhì)粒DNA的酶切線性化

• 為DNA片段制備特定的粘性末端

• 合成生物學(xué)與基因回路構(gòu)建

• 常規(guī)分子克隆實驗

使用說明

1. 反應(yīng)體系配置（以消化1 µg質(zhì)粒DNA為例）：

• 質(zhì)粒 DNA: 1 µg

• 10×反應(yīng)緩沖液: 5 µL

• BsaⅠ（20 U/µL）: 1 µL

• 無核酸酶ddH?O: 補足至50 µL

2. 反應(yīng)條件： 37℃孵育 1小時。

3. 失活/純化： 反應(yīng)完成后，可通過熱失活（65℃, 20分鐘）或使用DNA純化試劑盒進行純化以進行后續(xù)實驗。

4. 儲存： 本品為液體酶，請于-25 ~ -15°C保存，在此條件下可穩(wěn)定保存2年。

注意事項

1. 避免星號活性： 反應(yīng)體系中甘油的終濃度不應(yīng)超過5%，否則可能誘發(fā)星號活性（非特異性切割）。使用本產(chǎn)品時，請注意控制加入的酶體積。

2. 避免反復(fù)凍融： 請根據(jù)實驗用量進行分裝，并嚴(yán)格避免反復(fù)凍融，以保持酶活性。

3. 操作環(huán)境： 建議在無菌、無核酸酶的環(huán)境中進行操作。

保存條件
請置于-25 ~ -15°C冰箱中保存，避免反復(fù)凍融。

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