產(chǎn)品名稱(chēng)： Avi標(biāo)簽蛋白生wu素標(biāo)記試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào)： UA070015

產(chǎn)品描述
Avi標(biāo)簽蛋白生wu素標(biāo)記試劑盒是一種用于對(duì)Avi標(biāo)簽融合蛋白進(jìn)行位點(diǎn)特異性生wu素標(biāo)記的酶學(xué)試劑盒。其核心組分是來(lái)源于大腸桿菌的重組生wu素蛋白連接酶（BirA）。在ATP存在下，BirA能夠高效且特異地催化生wu素共價(jià)連接到Avi標(biāo)簽的特定賴(lài)氨酸殘基上，實(shí)現(xiàn)蛋白的單點(diǎn)、均一標(biāo)記。標(biāo)記后的蛋白可通過(guò)其生wu素與鏈霉親和素之間超高親和力（Kd ≈ 10?1? M） 的結(jié)合，廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)互作、活細(xì)胞成像、細(xì)胞分選等前沿研究。

產(chǎn)品特性

• 核心酶： 重組BirA連接酶

• 純度： >95%（經(jīng)SDS-PAGE和HPLC驗(yàn)證）

• 分子量： 約35 kDa

• 內(nèi)毒素： <0.5 EU/μg

• 性狀： 液體（50%甘油儲(chǔ)存液）

產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)

• 位點(diǎn)特異性標(biāo)記：確保生wu素精確、均一地標(biāo)記在Avi標(biāo)簽的特定位點(diǎn)，避免隨機(jī)標(biāo)記導(dǎo)致的蛋白功能干擾或結(jié)合不均一。

• 標(biāo)記效率高：優(yōu)化反應(yīng)體系，推薦條件下（40 μM Avi標(biāo)簽蛋白，2 μg BirA，37°C）可在30-60分鐘內(nèi)完成高效標(biāo)記。

• 操作流程明確：提供詳細(xì)的推薦步驟和配方，用戶(hù)可根據(jù)自身蛋白濃度靈活優(yōu)化反應(yīng)時(shí)間（30分鐘至過(guò)夜）。

• 應(yīng)用價(jià)值極gao：生wu素-鏈霉親和素系統(tǒng)是迄今已知zui強(qiáng)的非共價(jià)相互作用之一，標(biāo)記后的蛋白可用于Pull-down、SPR、BLI、超分辨率顯微鏡等多種高要求技術(shù)平臺(tái)。

• 經(jīng)文獻(xiàn)驗(yàn)證：產(chǎn)品背景引用了《Nature Protocols》等quan威期刊的相關(guān)方法學(xué)論文，技術(shù)成熟可靠。

應(yīng)用

• 制備用于蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用研究的生wu素化誘餌蛋白

• 用于基于表面等離子共振或生物膜干涉技術(shù)的生物分子互作分析

• 活細(xì)胞或固定細(xì)胞中目標(biāo)蛋白的超高分辨率成像與定位

• 細(xì)胞分選或基于親和力的蛋白純化

使用說(shuō)明

• 推薦反應(yīng)條件：

1. Avi標(biāo)簽蛋白濃度：建議 ≥ 40 μM（以獲得最jia標(biāo)記效率）。

2. 酶量：推薦每10 nmol Avi標(biāo)簽蛋白使用2 μg BirA。

3. 溫度與時(shí)間：37°C孵育30-60分鐘，或室溫孵育60-90分鐘。低濃度蛋白可延長(zhǎng)至過(guò)夜。

• 反應(yīng)體系：參照產(chǎn)品“操作步驟"中的表格，按比例混合Avi標(biāo)簽蛋白、10×反應(yīng)緩沖液（A/B/C）、BirA酶和無(wú)核酸酶水，總體積通常為250 μL。

• 標(biāo)記效率檢測(cè)：反應(yīng)完成后，可通過(guò)鏈霉親和素下拉實(shí)驗(yàn)或商業(yè)化的生wu素定量試劑盒來(lái)評(píng)估標(biāo)記效率。

• 儲(chǔ)存：BirA酶及緩沖液請(qǐng)于-20°C保存，避免反復(fù)凍融。

保存條件
自收貨之日起，于-20℃保存條件下，所有組分可穩(wěn)定保存12個(gè)月。